跳到主要內容區塊

南洋紅豆杉之腫瘤細胞及毛狀根誘導、培養與紫杉烷類生產

  • 公告日期:106-10-18
作者
張淑華、陳芬蕙、陳怡蒨、蔡錦瑩、陳媶、黃芷雲、呂汶玲、何政坤
出版年份
2017
關鍵詞
臺灣紅豆杉、腫瘤細胞、毛狀根、紫杉醇、紫杉烷類
摘要

本研究係利用農桿菌A281與農桿叢根菌AR 1600與ATCC15834建立南洋紅豆杉(Taxus sumatrana(Miq) de Laub)莖段與葉片的腫瘤細胞與毛狀根培養。農桿菌的轉殖率在不同菌種與單株間有很大的差異,以A281誘導產生腫瘤的轉殖率(42.3%)高於AR1600與ATCC15834的毛狀根轉殖率(15.1~19.2%)。比較7個不同單株的轉殖率,不論在腫瘤或毛狀根,都以E7與NJR最高,E2與J85最低且於接種AR1600無法產生毛狀根。有些毛狀根會產生癒合組織,此癒合組織和腫瘤細胞一樣,可於不含植物生長調節劑的培養基快速生長與生產紫杉烷類化物。以PCR確認農桿菌的iaaM基因及農桿叢根菌的rol B基因已轉移至腫瘤與毛狀根。腫瘤細胞、毛狀根與毛狀根癒合組織在MS固體培養基培養40天,生長指數(培養結束之培植體淨生長鮮重對開始培養鮮重比)為3.9~5.5,高於未轉殖癒合組織(2.5)與根(0.31)。調查10-DB, baccatin III與paclitaxel的含量,以腫瘤細胞與毛狀根產生的癒合組織較高。將腫瘤細胞與毛狀根移入液體培養基中培養30天,其生長量為8.13與6.03,高於固體培養基培養,顯示具有利用生物反應器放大培養的潛力。