農業部林業試驗所農業部林業試驗所

104年度 自辦科技計畫

青脆枝；Nothapodytes foetida；臺灣粗榧；Cephalotaxus wilsoniana；毛狀根培養；hairy root culture；農桿叢根菌；Agrobacterium rhizogenes；喜樹鹼；camptothecin；粗榧鹼類生物鹼；cephalotaxine type alkaloids

完成轉殖野生型農桿菌基因，建立青脆枝與粗榧毛狀根系。今年青脆枝接種農桿菌AR15834培育2個毛狀根，台灣粗榧進行AR15834, AR1600與AR1601農桿菌基因轉殖，結果農桿菌種類與粗榧枝品系都影響毛狀根形成率，3種農桿菌產生毛狀根的比例都以B1品系最高。定期以HPLC分析檢測毛狀根的二次代謝物含量，並以PCR確認農桿菌之rolB插入植物體中。選擇生長及喜樹鹼含量皆佳的青脆枝毛狀根JA12，進行10L 氣舉式生物反應器與2-L氣波浪式反應器培養，毛狀根於氣舉式反應器培養3個月毛狀根鮮重由原來的10g 增加為350-362g；波浪式培養5個月毛狀根鮮重由原來的5g 增加為1176g，顯示青脆枝的毛狀根具有大量生產喜樹鹼的潛力。將粗榧毛狀根以液體培養生長良好，培養30天鮮重由1g增加為1.83±0.15g。